期刊简介

               《中华实用儿科临床杂志》（原《实用儿科临床杂志》）是由中国科学技术协会主管、中华医学会主办的中华医学会系列杂志，是以儿科临床与基础研究为主要报道内容的儿科学类核心期刊。本刊为儿科学类核心期刊、中国科技论文统计源期刊（中国科技核心期刊），RCCSE中国核心学术期刊，中国科学引文数据库（CSCD）来源期刊，中国科学技术协会精品科技期刊，被中国生物医学文献数据库（CBMdisc）、Quick全文资料管理系统（FTME）、中文科技期刊数据库、万方数据、《中国学术期刊文摘》、美国《化学文摘》、俄罗斯《文摘杂志》、波兰《哥白尼文摘》、W HO西太平洋地区医学索引（W PRIM）、美国《乌利希斯期刊指南》等国内外数十家权威数据库收录。本刊以贯彻党和国家的卫生工作方针、政策，贯彻理论与实践、普及与提高相结合的方针，反映国内外儿科医疗、科研等方面的新理论、新技术、新成果、新进展，促进学术交流为办刊宗旨。辟有述评、专家论坛、学术争鸣、热点、论著、小儿神经基础与临床、中西医结合、实验研究、儿童保健、误诊分析、药物与临床、综述、小儿外科、病例报告、临床应用研究、儿科查房、标准•方案•指南、指南解读、国际期刊快通道、医学人文等栏目。以各级医院儿科医务工作者，各高等医学院校、科研院所儿科医教研人员，各级图书馆（室）、科技情报研究院（所）研究人员等为读者对象。欢迎广大儿科医务工作者和医学科教研人员踊跃投稿。本刊为半月刊，A4开本，80页，无光铜版纸印刷，每月5日、20日出版。CN 10-1070/R，ISSN 2095-428X，CODEN SELZBJ，Dewey #：618.92。国内外公开发行，国内邮发代号：36 - 102，国外邮发代号：SM1763。可通过全国各地邮局订阅，也可与本刊编辑部直接联系订阅邮购。国内定价：10.00元/期，240.00元/年；国外定价：10.00美元/期，240.00美元/年。欲浏览本刊或有投稿意向，请登录本刊网站（http：//www.zhsyeklczz.com），网站提供免费全文下载。联系地址：453003河南省新乡市金穗大道601号新乡医学院《中华实用儿科临床杂志》编辑部。联系电话：0373 -3029144，0373 -3831456；传真：0373-3029144；电子信箱 syqk@ chinajournal.net.cn。请优先登录中华医学会杂志社网站（http：//www.medline.org.cn）首页的“稿件远程管理系统”投稿。                

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  • 杂志名称：中华实用儿科临床杂志
  • 主管单位：中国科学技术协会
  • 主办单位：中华医学会
  • 国际刊号：2095-428X
  • 国内刊号：10-1070/R
  • 出版周期：半月刊
期刊荣誉：中国科技论文统计源期刊期刊收录：北大核心期刊(中国人文社会科学核心期刊), 万方收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 哥白尼索引(波兰), 知网收录(中), 上海图书馆馆藏, CSCD 中国科学引文数据库来源期刊(含扩展版), 维普收录(中), 国家图书馆馆藏, CA 化学文摘(美)
中华实用儿科临床杂志2017年第14期

miR-20a对肺泡上皮细胞A549合成肺表面活性物质的影响及其机制

洪慧；于新桥；王贝贝；蒋耀军；杨洋；周晓玉；周晓光；杨峰

关键词：miR-20a, 肺表面活性物质, 肺泡上皮细胞A549
摘要：目的 研究miR-20a对肺泡上皮细胞A549合成肺表面活性物质的影响及其可能的作用机制.方法 将成功构建的miR-20a过表达慢病毒载体(miR-20a组)与空载慢病毒(空载组)分别转染A549细胞,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达确定转染效率;采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖情况;生物信息学方法预测miR-20a促进肺发育的潜在相关靶基因;实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-20a、肺表面活性物质相关蛋白A(SP-A)、肺表面活性物质相关蛋白B(SP-B)、肺表面活性物质相关蛋白C(SP-C)和肺表面活性物质相关蛋白D(SP-D) mRNA的表达;免疫印迹法检测SP-A、SP-B、SP-C、SP-D及信号转导及转录活化因子3(STAT3)蛋白水平.结果 通过绿色荧光表达观察到慢病毒成功转染入A549细胞,RT-PCR提示转染miR-20a过表达慢病毒载体后miR-20a的表达(3.85-±0.18)较正常组(0.99±0.04)及空载组(1.21±0.12)显著增高,差异均有统计学意义(t=10.85、9.64,均P＜0.001),细胞株成功建立.与正常组(24 h、48 h、72 h:0.23±0.01、0.39±0.01、0.56±0.03)及空载组(24 h、48 h、72 h:0.25±0.01、0.44±0.05、0.59±0.01)比较,miR-20a对不同时间的A549细胞增殖(24 h、48 h、72 h:0.26±0.01、0.41±0.02、0.58 ±0.02)无影响,差异均无统计学意义(均P＞0.05).在线软件预测发现STA T3基因很可能是miR-20a的靶基因.与正常组(1.00±0.05、1.24±0.20、1.31 ±0.09、0.89±0.12)及空载组(0.76±0.10、1.31±0.13、1.50±0.11、1.01 ±0.11)比较,miR-20a可上调SP-A、SP-B、SP-C和SP-D mRNA的表达(2.05±0.17、2.14±0.10、2.84±0.09、1.66±0.08),差异均有统计学意义(均P＜0.05).与正常组(0.46±0.01、0.27±0.03、0.69±0.01、0.43±0.01)及空载组(0.43±0.01、0.21±0.01、0.79±0.02、0.44±0.02)比较,miR-20a也可上调SP-A、SP-B、SP-C和SP-D蛋白的表达(0.55±0.01、0.47±0.05、0.96±0.02、0.59±0.03),差异均有统计学意义(均P＜0.05)..与正常组(0.60±0.04)及空载组(0.68±0.06)比较,miR-20a组STAT3表达水平(0.37±0.05)显著降低,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 STAT3是miR-20a的靶基因,miR-20a很可能通过抑制STAT3表达来促进A549细胞合成肺表面活性物质.

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